激光掃描共焦顯微鏡的優(yōu)越性
1、動(dòng)態(tài)連續(xù)掃描及三維圖像重組
上海佑科儀器儀表有限公司了解到LSCM可以對(duì)對(duì)活細(xì)胞和組織或細(xì)胞切片樣品的不同層面進(jìn)行連續(xù)逐層掃描, 來獲得各個(gè)層面的圖像,即所謂的“無損傷的光學(xué)切片”。激光掃描共聚焦顯微鏡掃描的每個(gè)層面之間的間距可以達(dá)到0.1um甚至更小。獲得的圖像通過計(jì)算機(jī)重組,可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像。與普通光學(xué)顯微鏡獲得的圖像相比,LSCM所得 到的重組三維圖像清晰度高、立體感強(qiáng), 可通過計(jì)算機(jī)軟件對(duì)細(xì)胞內(nèi)所研究的結(jié)構(gòu)進(jìn)行各種測(cè)量,對(duì)細(xì)胞內(nèi)的空間結(jié)構(gòu)和某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位方面的研究中有廣泛的應(yīng)用。
2、同時(shí)多種物質(zhì)標(biāo)記
利用LSCM,通過對(duì)膜上、胞漿內(nèi)多種物質(zhì)的熒光標(biāo)記,可以實(shí)現(xiàn)在同一樣品上同時(shí)進(jìn)行多重物質(zhì)的觀察,比如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率及動(dòng)態(tài)變化。
3、瞬時(shí)分辨率高
可以實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察活體組織標(biāo)本。LSCM 的熒光檢測(cè)器可以毫秒級(jí)或微秒級(jí)的速度檢測(cè)熒光,即其時(shí)間分辨率極高,能對(duì)細(xì)胞內(nèi)的分子進(jìn)行功能性動(dòng)態(tài)觀察。上海佑科儀器儀表有限公司了解到LSCM技術(shù)可對(duì)活細(xì)胞在無損傷處理的情況下進(jìn)行觀察,跟蹤活細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)和生理過程隨時(shí)間變化的情況,得到實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的連續(xù)圖像。
4、 高質(zhì)量數(shù)字圖像
上海佑科儀器儀表有限公司了解到普通顯微鏡采用的自然光或燈光是一種場(chǎng)光源,標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射光或散射光的干擾。LSCM以激光為光源,激光具有單色性強(qiáng)、方向性好、高亮度﹑相干性好等優(yōu)點(diǎn),可以避免普通顯微鏡的缺點(diǎn)。一般常用的氣體激光器如氬(Ar)﹑氪(Kr)﹑氦(He)﹑氖(Ne)。由于LSCM的樣品焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像,這樣就避免了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡由于光散射造成的圖像信噪比降低,圖像清晰度和分辨率不高的缺點(diǎn)。而且,LSCM的圖像是以電信號(hào)的形式記錄下來的,可以采用各種模擬的和數(shù)字的電子技術(shù)進(jìn)行各種圖像處理。